简单介绍下尤斯灌流系统的操作流程

更新时间：2026-03-23

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尤斯灌流系统（UssingChamber）用于离体上皮组织/细胞层的跨膜转运与电生理研究，操作核心是组织固定、双侧灌流、恒温供氧、电信号采集，标准流程如下：

一、实验前准备

系统清洁与组装

清洗尤斯室、管路、电极；组装腔体，安装Ag/AgCl电极（电压传感、电流通过）与盐桥，确保密封无渗漏。

溶液配制与预氧

配制Ringer液/克氏液，通95%O₂+5%CO₂30分钟以上，维持pH与氧分压；开启37℃恒温与磁力搅拌。

组织/细胞制备

组织：取肠道、气道等上皮，剥离黏膜层，修剪成合适大小。

细胞：Transwell培养单层上皮，待形成紧密连接后使用。

二、组织安装与灌流

组织固定

将组织/细胞夹在尤斯室两半之间，黏膜侧（顶侧）、浆膜侧（基底侧）严格区分，锁紧腔体防漏液。

双侧灌流

顶侧、基底侧分别注入预氧灌流液，开启循环/连续灌流，排除气泡；维持液面一致，启动搅拌。

平衡稳定

灌流平衡30–60分钟，待跨膜电位（PD）、短路电流（Isc）、电阻（TEER）稳定，确认组织活性。

三、电生理检测与实验干预

基线记录

电压钳/电流钳采集PD、Isc、TEER，记录基线数据。

给药/处理

顶侧或基底侧加入药物、待测物、离子等，观察电信号动态变化；可设对照组、浓度梯度组。

数据采集

持续记录Isc、TEER变化，分析转运速率、通透性、离子通道活性。

四、实验结束与后处理

停止灌流

关闭灌流、搅拌、恒温，取出电极与盐桥。

组织/腔体清洁

取出组织/细胞；用清水、温和清洁剂清洗腔体与管路，干燥保存；电极维护（AgCl层定期处理）。

数据导出与分析

导出电生理数据，计算转运量、通透性、通道电流等指标。

关键要点

密封防漏是核心，漏液会导致电信号异常、实验失败。

持续供氧+恒温是维持组织活性的关键。

电极需校准，避免电位漂移影响数据准确性。