推荐一些跨膜细胞电阻仪的使用教程

 

准备仪器主机、电极探头、校准电阻件、Transwell培养小室、空白小室、培养基、无菌PBS缓冲液，放置超净台内操作。检查仪器电源线、电极连接线有无破损，接头是否紧固。检查电极，银/氯化银电极如果长期存放，提前做氯化处理，使用前用无菌缓冲液润洗。准备空白对照小室，不含细胞，仅加入等量培养基，用于扣除基底膜和培养基带来的背景电阻。测量前将培养板放置恒温加热板，尽量维持37摄氏度，温度变化会直接造成电阻读数漂移。

 

开机与仪器校准

 

接通电源，开启主机，预热3至5分钟，等待电路稳定。接入配套标准校准电阻，切换至欧姆测量模式，执行仪器校验，确认读数和标准电阻数值一致。取出电极，浸入和实验体系相同的培养基或者PBS溶液，浸泡平衡几分钟，稳定电极电位，消除电极极化带来的误差。平衡完成后，擦干电极外部多余液体，准备样品检测。

 

样品放置与电极操作

 

取出Transwell培养小室，平稳放置。叉状电极内侧短电极放入小室上腔，外侧长电极放入外孔下腔，保持电极垂直，电极尖端不要触碰底部滤膜和细胞单层，避免刮破细胞屏障。上下腔培养基液面高度保持一致，液面差会产生液接电位，造成测量偏差。每个孔可以更换2到3个不同位置测量，取平均值，降低位置带来的随机误差。同批次样品之间检测时，用无菌培养基润洗电极，减少样品交叉污染。

 

样品检测与数据计算

 

启动测量，等待读数稳定后记录电阻数值。先测空白小室的背景电阻，再测量带有细胞单层的样品电阻。真实跨膜电阻等于样品测得电阻减去空白背景电阻，再根据小室有效膜面积换算成单位面积电阻值。连续监测实验，按照设定时间间隔重复测量，记录不同时间点的TEER数值，跟踪细胞紧密连接形成与变化。如果配套工作站软件，可直接采集、存储数据，导出表格文件。

 

实验结束操作

 

全部样品测量完毕，缓慢取出电极，不要磕碰电极尖端。使用无菌缓冲液轻轻冲洗电极表面残留培养基。电极短期存放，浸泡在PBS缓冲液；长期存放，干燥避光保存。关闭仪器采集程序，关闭主机电源。清理工作台，擦拭台面液体，盖好仪器防尘罩。

 

电极维护要点

 

电极不能长时间浸泡在纯水内，容易破坏氯化银镀层。灭菌优先选用70%乙醇短时浸泡，浸泡后必须用缓冲液充分冲洗，不可长时间浸泡乙醇。频繁使用时，定期进行电极氯化修复，提升电位稳定性。电极尖端禁止硬物刮擦，镀层磨损会造成读数不稳定、数据漂移。

 

关键操作注意事项

 

操作过程动作轻缓，电极触碰滤膜会直接破坏细胞单层，导致实验作废。尽量缩短培养板移出培养箱的时间，减少温度波动。避免电极之间互相触碰，防止短路。测量采用交流小电流模式，不要使用过大激励电流，防止刺激细胞、破坏紧密连接。每次实验必须设置空白对照，不扣除背景电阻会造成结果偏高。同一组实验保持电极插入深度、液面高度、温度条件统一，保证数据可对比。仪器定期用标准电阻校验，排查电路漂移。